2021年中考生物知识点之：分离土壤中分解尿素的微生物

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　　分离土壤中分解尿素的微生物

　　1．筛选菌株

　　原则：

　　人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长。

　　培养基的成分：

　　尿素作为惟一的氮源（选择培养基、固体培养基）。

　　2.菌落培养和计数

　　对照：

　　将不接种的培养基置于相同温度恒温箱培养，目的是证实培养基是否被杂菌污染（或灭菌是否彻底）。

　　统计菌落数目的方法：

　　（1）显微镜直接计数法

　　利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积样品中微生物数量。缺点是不能区分死菌与活菌。

　　（2）间接计数法(活菌计数法)

　　①原理：

　　当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

　　②计算公式：

　　每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。

　　③操作：

　　设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数（个人认为，浙科版认为每个培养皿中有20个以内菌落，目的是分离，然后培养得到较大的菌落）。

　　3.菌种的鉴定

　　方法：

　　检测培养基pH的变化判断，用酚红指示试剂来鉴别，菌落周围有红色环带。

　　原理：

　　在细菌分解尿素时，分泌的脲酶将尿素分解为氨，氨使培养基碱性增高，pH升高，使酚红呈红色（红色环带）。

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